一、導言
近日，圣庭醫療與臺州學(xué)院附屬臺州中心醫院、臺州學(xué)院醫學(xué)院腫瘤研究所、臺州學(xué)院附屬臺州市醫院、臺州學(xué)院醫學(xué)院藥理學(xué)系的聯(lián)合研究發(fā)現，殺傷細胞免疫球蛋白樣受體2DL4（KIR2DL4）的敲低或過(guò)度表達可以分別抑制或促進(jìn)腎細胞癌（RCC）增殖。研究成果在中科院二區期刊《LIFE SCIENCES 》IF=6.780上發(fā)表，該研究結果有望為尋找潛在的RCC抗癌藥物提供理論基礎。
二、研究?jì)热?/span>
本研究納入了TCGA數據庫531例RCC的患者，使用了生物信息學(xué)分析、免疫組織化學(xué)、免疫印跡等技術(shù)對KIR2DL4是否由RCC表達及其在RCC進(jìn)展中的可能作用進(jìn)行了研究。
三、研究結果
NO.1 KIR2DL4在RCC中過(guò)量表達
在本研究中，利用GEPIA在線(xiàn)分析工具進(jìn)一步分析了不同等級RCC的KIR2DL4 mRNA表達水平，我們發(fā)現KIR2DL4的mRNA表達隨著(zhù)RCC等級的增加而增加 (圖1a) 。
圖1 KIR2DL4在RCC細胞系中的蛋白表達情況。
GAPDH被用來(lái)作為內參。
NO.2 敲低KIR2DL4的表達會(huì )降低Caki-1和769-P細胞的細胞活力和細胞系形成
通過(guò)轉染KIR2DL4-shRNA敲低KIR2DL4在Caki-1 和769-P細胞中的表達，并檢查其對它們增殖表型的影響。結果如圖2c和3c所示，KIR2DL4敲低可以明顯降低約35% Caki-1和769-P細胞的活力。在細胞周期檢測中，KIR2DL4敲低后約50%~70%的細胞 G1/G0停滯(圖2d和3d) ，這表明KIR2DL4敲低抑制了Caki-1和769-P細胞的細胞系形成。
圖2 KIR2DL4敲低可以減少Caki-1細胞的增殖。
圖3 KIR2DL4敲低可以抑制769-P細胞的增殖，
KIR2DL4敲低對細胞周期分布的影響。
NO.3 KIR2DL4可影響腫瘤相關(guān)途徑和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K) /AKT信號途徑
免疫印跡檢測顯示，在KIR2DL4高表達的Caki-1和769-P細胞中，磷酸化的AKT水平被上調 (圖4c) ，而在KIR2DL4敲低的Caki-1細胞中，磷酸化的AKT水平在KIR2DL4被敲低后下降 (圖4d)，這些觀(guān)察表明，KIR2DL4可能通過(guò)PI3K/AKT途徑促進(jìn)RCC的進(jìn)展。
圖4 通過(guò)免疫印跡分析KIR2DL4過(guò)表達或敲低后的AKT磷酸化水平，GAPDH用作內參。
四、小結與啟發(fā)
在過(guò)去的十年中，一些靶向藥物被美國食品和藥物管理局 (FDA)批準用于RCC治療，包括索拉非尼、舒尼替尼、替米羅莫司和Ever-olimus[1-3]。在這個(gè)時(shí)間框架內，RCC的中位總生存率有了明顯的改善。此外，隨著(zhù)2015年FDA批準nivolumab用于晚期RCC患者，免疫療法也在重新興起[4-5]?？偟膩?lái)說(shuō)，RCC的免疫療法正在獲得研究興趣。
在本研究中，我們的研究結果表明KIR2DL4在RCC細胞中過(guò)度表達，而KIR2DL4的敲低或過(guò)度表達可以分別抑制或促進(jìn)RCC細胞增殖。此外，過(guò)表達KIR2DL4的Caki-1和769-P細胞的pAKT水平更高，這表明KIR2DL4可能通過(guò)PI3K/AKT信號通路促進(jìn)RCC的進(jìn)展?；谠撗芯拷Y果，有望為尋找潛在的RCC抗癌候選藥物提供理論基礎。
參考文獻
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